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家蚕胺类受体膜蛋白基因表达及重组产物纯化
2011-04-06 中国科技论文在线 张烁烁 吕正兵 聂作明 张耀洲
  从本实验室构建的家蚕膜蛋白库中获得一条氨基酸残基序列,经同源比对发现其为家蚕中的未知功能序列,与埃及伊蚊,丽蝇蛹集金小蜂,木蚁的胺类受体蛋白具有40%的同源性,推测家蚕中的这个未知功能的膜蛋白在功能上与它们可能存在相似性,将命名为家蚕胺类受体膜蛋白(BmATl)。该膜蛋白编码147个氨基酸,具有两个跨膜区,分子量为16.52kD,其基因的ORF为444 bp。将BmATl基因与多角体Polh基因融合后,分别在大肠杆菌表达系统与家蚕杆状病毒表达系统中获得了成功高效地表达。在大肠杆菌BL21(DE3)中获得的重组膜蛋白,以包涵体的形式存在于沉淀中。但是利用多角体的特性,通过反复改变缓冲液的pH值和离心的方法,就可以简便地获得较纯的目的蛋白,从而确定了一种新的简单便捷的膜蛋白纯化方法,为进一步研究其功能打下良好的基础。

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