中国教育和科研计算机网
EDU首页 | 中国教育 | 高校科技 | 教育信息化 |  CERNET |  公开课导航
首页  |  科技前沿  |  科普知识  |  评论  |  人才  |  高校成果  |  高校资讯  |  会议通知  |  专题报道  |  数据排行  |  每日要闻  |  每日全部资讯

CERNET第24届学术年会
选择字体:    王美惠 王军军 李佳 于威 张耀洲  中国科技论文在线  发布时间:2012-03-26

家蚕贮藏蛋白基因sp2的克隆表达及其功能研究

  家蚕贮藏蛋白2 (Storage Protein 2, SP2)不仅是家蚕生长发育过程中重要的能源物质,而且还具有抑制细胞凋亡的活性。本研究从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中克隆了sp2基因(GenBank登录号:DQ443358),构建重组质粒pET-28a(+)-sp2,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达融合蛋白,镍柱亲和层析纯化后免疫新西兰雄兔获得多克隆抗体。用Western blot方法检测了SP2在家蚕各发育时期和五龄幼虫各组织中的分布情况,结果发现,SP2在蛹期和五龄幼虫的血淋巴中含量较高,而在卵及蛾期没有检测到该蛋白。通过亚细胞定位发现,该蛋白主要存在于细胞膜和细胞质中。同时利用Bac-to-Bac系统构建了含有sp2基因的重组杆状病毒表达载体,在家蚕BmN细胞中大量表达带有6×His标签的融合蛋白并纯化,将纯化的SP2作用于星孢菌素诱导凋亡的人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC),MTT检测结果表明,SP2能明显增强HUVEC的活力;进一步利用ELISA法检测DNA片段化程度并利用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,结果均表明SP2对星孢菌素诱导的HUVEC凋亡具有一定的抑制作用。

>>查看原文初稿链接<<

>>更多科技论文<<

特别声明:本站注明稿件来源为其他媒体的文/图等稿件均为转载稿,本站转载出于非商业性的教育和科研之目的,并不意味着赞同其观点或证实其内容的真实性。如转载稿涉及版权等问题,请作者在两周内速来电或来函联系。
分享到 更多

版权所有:中国教育和科研计算机网网络中心 Copyright © 1994-2017 CERNIC,CERNET,京ICP备05078770号,京网文[2014]2106-306号

关于假冒中国教育网的声明 | 有任何问题与建议请联络:Webmaster@cernet.com