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海洋所贝类样品制备方法获国家发明专利

http://www.edu.cn 2006-07-04中科院网站
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  日前,由中国科学院海洋研究所阙华勇研究员等完成的“一种适用于流式细胞术检测倍性的贝类样品制备方法”获国家发明专利授权。该发明的优点是:方法简便可行,所用的均为常见的试剂、器材等,适用于实验条件相对较差的贝类种苗培育场;采用本发明所制备的贝类样品,实现了在常温下长期保存和运输,并且样品在流式细胞仪上的检出率高且稳定(实践证明,保存6个月时检出率可达100%),灵敏度高,彻底克服了普通方法制备的样品需要冷冻保存和运输的局限性;应用范围广,适用于各种贝类以及贝类各个发育阶段的样品,可应用于包括牡蛎、扇贝、蚶、青蛤、硬壳蛤、鲍等种类,包括各个发育期的幼虫、稚贝、幼贝和成贝。四是采用该发明制备的生物样品可以满足批量样品的倍性检测;可以对成贝实施活体倍性检测,该发明提供了进行贝类多倍体倍性鉴定的高效手段。

  据悉,目前流式细胞术样品的制备,要求活体样品或冷冻保存的固定样品,对幼虫或幼体来说,要保持其活力需要苛刻的运输条件,包括用海水作媒介、充氧、低温等,为运送样品造成了很大的局限性。国外学者尝试利用甲醇/冰醋酸固定液或乙醇固定样品,在常温下运输,研究发现运输费时3至5天的这些固定样品在流式细胞仪上的检出率很低,通常为10-30%,对发育后期的眼点幼虫等样品,基本上无法检测。由此可见,普通的固定方法制备的生物样品,远远达不到流式细胞术对检测样品的要求。国内外海洋水产界都迫切需要一种新的流式细胞术样品制备方法,实现在常温长时间保存下的高检出率。该发明解决了这一难题,特别提供了适用于流式细胞术检测倍性的贝类样品的制备方法,实现了贝类各类样品在常温下保存和长途运输,样品在流式细胞仪上具有稳定的高检出率。

 

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